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2021-08-23

純水機是指水中鹽類（主要是溶于水的強電解質(zhì)）除去或降低到一定程度的凈水設(shè)備。生產(chǎn)出的純水電阻率（25℃）一般為1.0-10.0μS/cm，含鹽量為1-5mg/L。純水機是一種采用多級濾芯進行水質(zhì)凈化處理的凈水設(shè)備，處理多使用不添加化學物質(zhì)的過濾、吸附、反滲透等物理方法。根據(jù)純水機凈水精度可以分為生活飲用型純水機，也叫家用純水機和可達到純凈水質(zhì)要求的用純水機兩類。純水機是常見的設(shè)備，用水也是貫徹整個實驗的關(guān)鍵，如何正確使用純水機不僅僅關(guān)系到水質(zhì)，也關(guān)系到其使用壽命，下面將為您詳...

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大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備經(jīng)驗之談

2021-08-19

細菌處于容易接受外源DNA的狀態(tài)稱之為感受態(tài)，通過物理或化學的方法，人工誘導細菌細胞成為敏感的感受態(tài)細胞是重組DNA轉(zhuǎn)化細菌技術(shù)的關(guān)鍵。制備出感受態(tài)細胞，我們就可以方便的將需要克隆的質(zhì)粒導入其中，使其繁殖，從而獲得大量的質(zhì)粒。CaCl2轉(zhuǎn)化法是常用的感受態(tài)細胞制備方法，其制備流程簡單，快捷，成本低，并且能夠滿足普通的轉(zhuǎn)化和克隆的需求。判斷感受態(tài)細胞制備的優(yōu)劣主要是通過轉(zhuǎn)化效率來檢測。經(jīng)轉(zhuǎn)化外源質(zhì)粒DNA的大腸桿菌在含抗性的LB平板過夜培養(yǎng)后，平板上長滿克隆且陰性對照（未轉(zhuǎn)入外...

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CRISPR/cas9 基因編輯技術(shù)

2021-08-16

CRISPR/Cas系統(tǒng)是原核生物的一種天然免疫系統(tǒng)，存在于大多數(shù)細菌和古生菌中。原核生物在遭到病毒入侵后，能夠把病毒DNA的一小段提取出來并存儲到自身基因組上的特定區(qū)域，我們把這個區(qū)域稱為CRISPR存儲空間。當再次遇到病毒入侵時，原核生物能夠根據(jù)存儲的DNA片段識別病毒，將病毒的DNA切斷而使之失效。目前應(yīng)用*泛的CRISPR/Cas系統(tǒng)是來源于釀膿鏈球菌(Streptococcuspyogenes)的CRISPR/Cas9系統(tǒng)。天然的CRISPR-Cas9系統(tǒng)由三部分組...

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小動物活體成像技術(shù)

2021-08-13

分子成像的發(fā)展：1999年，美國哈佛大學Weissleder等人提出了分子影像學（molecularimaging）的概念——應(yīng)用影像學方法，對活體狀態(tài)下的生物過程進行細胞和分子水平的定性和定量研究。傳統(tǒng)成像大多依賴于肉眼可見的身體、生理和代謝過程在疾病狀態(tài)下的變化，而不是了解疾病的特異性分子事件；分子成像則是利用特異性分子探針追蹤靶目標并成像。這種從非特異性成像到特異性成像的變化，為疾病生物學、疾病早期檢測、定性、評估和治療帶來了重大的影響。分子成像技術(shù)使活體動物體內(nèi)成像成...

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質(zhì)粒提取竅門

2021-08-12

提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種，從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取，從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取，從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法等，各種不同的方法各有其優(yōu)缺點，根據(jù)不同的實驗?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。堿裂解法：使用堿與SDS裂解法從E.coli（大腸桿菌）中分離制備質(zhì)粒DNA已有30多年的歷史。將細菌懸浮液暴露于高pH值的強陰離子洗滌劑中，會使細胞壁破裂，染色體DNA和蛋白質(zhì)變性，將質(zhì)粒DNA釋放到上清中。堿性溶劑使堿基配對*破壞，閉環(huán)...

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RNA免疫共沉淀技術(shù)

2021-08-12

RNA免疫共沉淀（RNAimmunoprecipitation，RIP）是一種基于抗體的技術(shù)，用于定位體內(nèi)的RNA-蛋白質(zhì)相互作用。將所關(guān)注的RNA結(jié)合蛋白(RBP)與其結(jié)合的RNA一起進行免疫沉淀，鑒定結(jié)合轉(zhuǎn)錄RNA（mRNA、非編碼RNA或病毒RNA），可以通過實時PCR、微陣列或測序檢測。表觀遺傳學和RNA生物學領(lǐng)域?qū)Σ煌琑NA作用和功能的關(guān)注大大增加。據(jù)觀察，RNA的功能遠不止轉(zhuǎn)錄和后續(xù)的翻譯。例如，RNA-蛋白質(zhì)相互作用能夠調(diào)控mRNA和非編碼RNA的功能。對RNA...

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細胞凋亡檢測

2021-08-11

細胞凋亡（apoptosis）指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。下面介紹幾種常用的檢測細胞凋亡的方法。一、TUNEL法脫氧核糖核苷酸衍生物digoxin在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了...

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